本帖最后由 情若不归 于 2011-7-12 09:52 编辑
作此分析的缘由： 最近听到同行用3M片做实验的挺多，并且有把它用来做MPN法的，传统口语9管法，即一片相当于一管，只看定性，根据阳性片数，查MPN表报告结果。 其实很多同行都在用了，怕是我孤陋寡闻，刚刚明白过来。 由此，很多问题就不期而至。 一般情况下，既然用来3M，就不再用常规法，但一些时候， 会同时用3M片和传统MPN法，这样实验结果往往出入大，很大，不在一个数量级，所以有些苦恼，不知道到底哪个才是正确的。 MPN。统计学概率 3M。平板计数或定性用于MPN法 MPN中最大可能值一般小于阳性管最大稀释倍数乘以1。 这句话很重要。这就是3M数比MPN数大的关键所在。 下面从一下几点浅谈一下。 1.检出限 常规MPN法检出限低，如果样品中含菌量少，MPN有能检出，3M来做平板计数未必能检出。这个一般是从接种量上来考虑，液体样品的话，原液接种， 两者不差上下，固体样品，则只能从十倍稀释做起，这样常规MPN法检出限是3，而3M片是10。此时3M片是用来计数定量的。 2.对比 3M片一般和固体计数平板来对比，意义可以肯定。比如做大肠菌群，3M大肠菌群测试片和VRBA琼脂平板来对比。当3M片和常规MPN法对比时，MPN有95%的 上下限可信区，3M测试片计数如果落在上下限可信区间，对比成功。并且此时3M是CFU定量，理论上更可认为是较正确值。 3.理论上 有同志分析，在理论上，比如金葡的检验，MPN法有增菌步骤，应该比3M片的检出率高，我认为也未必，MPN检索表已经充分考虑概率，MPN数一般在可 信区间的中下段，并且偏下段。MPN法本来就是在适用于含有大量杂菌并且目标菌含量较少的样品，含菌量少的话，用MPN法检出的成功率高。如果菌量在10/g 以上，你就可以看出到底哪个检出量高。所以接下来就看实际应用了。 4.实际应用 3M片计数一般会比MPN法大，大不少，数量级有差别，事实应该是这样，我们只能困惑，疑问，到底是什么原因造成这样的？ 我想3M计数一般大于MPN数，这样结果可能的原因有 A.3M菌落多数未做验证。 B.3M片菌落以偏概全，菌落单位直接作为乘以稀释倍数。 C.3M虽然没前增菌，但灵敏度不可低估。 D.MPN表已经充分考虑概率。 E.MPN法中某些培养基雷竞技百科 。 F.MPN中最大可能值一般小于阳性管的最大稀释倍数乘以1。这句话很重要。这就是3M计数比MPN数大的关键所在。 以上是3M作为平板计数和MPN法的比较，接下来才书归正传，进入正题，啰嗦，啰嗦啊。 5.用3M片做MPN方法 我用3M片很少，公司老板也没大方到这个程度（平时买点什么都唧唧歪歪的，鄙视下），所以是刚刚才知道的。 当3M作为平板计数时，15—150为计数适宜范围，所有稀释度都不在适宜范围内，小于15的才用于计数（这个希望没说错吧 ）。但作为MPN中一管（片） 的话，按定性来计，只要长菌就计为阳性。这就无形中扩大了3M的计数范围，这点上按道理说，不能影响和常规MPN的计数，因为只要接入一个菌，3M片能长 出来，常规MPN所用培养基也应该增长，进而都为阳性。问题往往出在这里。假设同样接入一个菌，3M片能长出来，但不一定进行验证，而常规培养基就未必 能增出来，造成假阴性。这是谁的错？？？常规培养基的错吗？ 进而的问题，我们应该相信谁？常规MPM法，3M测试片计数？3M的MPN数？ 定量的微生物的问题，数量级不出现问题，基本上不出现什么大问题，是不是？ 解决。 解决？？？？？？ 嘿嘿，当然我解决不了了。 那还是注意一下几点吧： 一．。3M提高计数适宜范围吧？ 二．。3M的MPN中长一个菌的片可以不计吗（定性）？ 三．。注意3M的计数阶梯性，不计数也要看看啊，错在这就不好了哈。 四．。TSB，某厂家的，是不太好。 这些只是自己体会，况且自己不用3M,所以妄想的多，大家批评指正啊，欢迎拍砖。 |
发表于 2011-7-10 13:02
）。但作为MPN中一管（片）
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