HPLC常见问题：保留时间漂移

王中泰

HPLC常见问题：保留时间漂移

液相色谱峰的保留时间不重现分为两种情况：一是保留时间单方向的漂移，即保留时间提前或延后；二是保留时间无规律的波动，即保留时间忽前忽后。下面我们来说说主要的影响因素及如何改善。
1、色谱柱平衡不够。
若发生保留时间漂移，需要考虑流动相是否已使色谱柱达到充分的平衡。一般情况下，流动相平衡色谱柱需要10-20个柱体积；但如果流动相中有使用弱酸、弱碱、缓冲盐和离子对试剂，或者固定相为正相硅胶等，则需要更长的时间来平衡色谱柱。

二、色谱柱污染或受损。
这时也可能会导致保留时间的漂移，需要同时观察色谱峰型、柱效、压力的变化情况，推测色谱柱是否被污染。可以根据具体的测试条件来选择适当的溶剂进行色谱柱的冲洗，或更换新的色谱柱。为了延长色谱柱的使用寿命，增加保护柱是非常有效的方法。

三、柱温改变。
确认柱温的准确性，柱温的变化也会导致保留时间的变化。

四、流动相改变。
流动相中某种试剂的挥发，流动相中不同试剂的比例配制有误，也会导致保留时间的变化，需要确认流动相是否新鲜与正确。

五、流速改变。
观察柱前压力，如果压力不稳定或者偏离正常值，可能是泵流速不准确或者有气泡产生，出现保留时间的不稳定，需要保证仪器流速的准确性与稳定性。

六、系统存在泄露或堵塞
观察系统压力，如果几次进样的压力曲线不能重合或差别比较大，可能是系统存在泄露或堵塞，出现保留时间的不稳定，需要依次排查系统中有无漏液或堵塞异常。

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