沉降菌、浮游菌监测点设置相关法规简洁整理篇

王中泰

沉降 菌、浮游菌监测 点设置相关法规简洁整理篇

USP29-1116

表 1 基于控制环境重要性的建议取样频率

样地面积	取样频率
洁净级 100 或更好的设计室	每个操作交接
刚靠近洁净级 100 的支持区 ( 如 10,000 洁净级 )	每个操作交接
其它支持区 (100,000 洁净级 )	每周两次
潜在的产品 / 容器接触区	每周两次
其它无菌操作区但非产品接触区支持区 (100,000 洁净级或较低 )	每周一次

由于操作过程中手工介入的增加以及人员接触产品潜在性的增加，使得环境监测程序的相对重要性增加。

环境监测对于无菌操作生产的产品来说，远比生产后进行终端灭菌的产品要重要得多。

确定和定量对后继灭菌处理具有抗性的微生物，远比在制造环境周围进行微生物环境监测要重要得多。

如果终端灭菌循环不是基于过度杀伤循环，而是基于生物负担优先灭菌，那么生物负担的评估就是关键性的。

取样策略应当是动态性的，即监测频率和取样策略位置的动态性。其动态调整是以趋势特征为根据的。根据这一趋势可以进行适当的增加或减少取样。

医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法

GB/T 16294-2010

5.4 沉降菌计数 5.4.1 采样点数目及其布置 5.4.1.1 最少采样点数目沉降法的最少采样点数可按表 2 确定。
表 2 最少采样点数目

面积 m2	洁净度级别
	100	10 000	10 0000
<10	2 ～ 3	2	2
≥～ <20	4	2	2
≥～ <40	8	2	2
≥ 40 ～ <100	16	4	2
≥ 100 ～ <200	40	10	3
≥ 200 ～ <400	80	20	6
≥ 400 ～ <1000	160	40	13
≥ 1000 ～ <2000	400	100	32
2000	800	200	63

注：表中的面积，对于单向流洁净室，指的是送风面面积，对非单向流洁净室是指的房间面积。
在满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数，见表 3 。

表 3 最少培养皿数

洁净度级别	所需 ? 90mm 培养皿数（以沉降 0.5h 计）
100	14
10 000	2
100 000	2
300 000	2

5.4.1.2 采样点的布置

采样点的位置可以同悬浮粒子测试点。

（ a ）工作区采样点的位置离地 0.8m ～ 1.5m 左右（略高于工作面）。

（ b ）可在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。

洁净室施工及验收规范 GB 50591-2010

E.8 悬浮微生物的检测

E8.3 沉降菌检测应符合下列要求：
1 、使用直径 90mm( φ 90) 的培养皿采样。当采用其他直径培养皿时，应使其总面积和φ 90 皿总面积相当。

2 、培养皿中灌注胰蛋白酶大豆琼脂培养基，必须留样作阴性对照。

3 、培养皿表面应经适当消毒清洁处理后，布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点。在乱流洁净室内培养皿不应布置在送风口正下方。

4 、当用户没有特定要求时，培养皿应布置在地面及其以上 0.8m 之内的任意高度。

5 、每一间洁净室或每一个控制区应设 1 个阴性对照皿。

6 、动态监测时也可协商布点位置和高度。

7 、培养皿数应不少于微粒计数浓度的测点数，如工艺无特殊要求应大于等于表 E.8.3 中的最少培养皿数，另外各加一个对照皿。

王中泰

GMP 附录一 无菌药品

第十一条 应当对微生物进行动态监测，评估无菌生产的微生物状况。监测方法有沉降菌法、定量空气浮游菌采样法和表面取样法（如棉签擦拭法和接触碟法）等。动态取样应当避免对洁净区造成不良影响。成品批记录的审核应当包括环境监测的结果。

对表面和操作人员的监测，应当在关键操作完成后进行。在正常的生产操作监测外，可在系统验证、清洁或消毒等操作完成后增加微生物监测。

表 4 洁净区微生物监测的动态标准

洁净度级别	浮游菌 cfu/m3	沉降菌（ 90 ? mm ） cfu /4h	表面微生物
			接触（ ? 55mm ） cfu / 碟	5 指手套 cfu / 手套
A 级	＜ 1	＜ 1	＜ 1	＜ 1
B 级	10	5	5	5
C 级	100	50	25	-
D 级	200	100	50	-

注：

（ 1 ）表中各数值均为平均值；

（ 2 ）单个沉降碟的暴露时间可以少于 4 小时，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数。

第十二条 应当制定适当的悬浮粒子和微生物监测警戒限度和纠偏限度。操作规程中应当详细说明结果超标时需采取的纠偏措施。

欧盟《 GMP 》附录 1 无菌药品生产 2008 版

17 、下表列出了各级区内示例性生产操作（可参见第 28 条至第 35 条）

Grade	最终灭菌产品的生产操作（参见 28 — 30 条）
A	高污染风险产品的灌装
C	高污染风险药液的配制，药液的灌装
D	灌装前原辅包装材料的准备、药液的配制

Grade	无菌操作（参见 31-35 条）
A	无菌配制和灌装
C	过滤前药液的配制
D	清洁后原辅包装材料的处理

当实施无菌操作时，应经常的对微生物进行动态监测，监测方法有沉降碟法、定量空气采样法和表面取样法（如：药签擦拭法和接触碟法）等。动态取样须避免对洁净区造成不良影响。

在成品批档案审核，应同时考虑环境监测的结果，决定是否放行。

表面和操作人员的监测，应在关键操作完成后进行。

除生产操作之外，还需进行其他微生物监控，例如在系统验证、清洁和消毒操作后。

19 、洁净区微生物监控的动态参考标准如下：

微生物污染限度参考标准
Grade 级别	( 空气样 )cfu/m3	沉降碟 ( Φ 90 mm)cfu/4h (b)	接触碟 ( Φ 55 mm)cfu/ 碟	5 指手套 cfu/ 手套
A	<1	<1	<1	<1
B	10	5	5	5
C	100	50	25	-
D	200	100	50	-

注：

(a) 表中各数值均为平均值；

(b) 单个沉降碟的暴露时间可以少于 4 小时。

13791166860

感谢分享，又学新知识了

王中泰

13791166860 发表于 2023-12-19 16:44
感谢分享，又学新知识了

谢谢您的关注！