微生物实验的灭菌时间、培养基煮沸时糊地问题。。

紫鸿狼烟

实事求是的精神没错，

同时多和实验员沟通。

最基本的信任还是要有的。

ranran1220

随便取的用户名 发表于 2023-11-27 15:28
您好 还想问一下 菌落大肠的培养基 煮沸后需要立刻盖上吗

煮好后，我们是用保鲜膜封上的，防止染菌，也防止表层产生干膜，然后放水浴锅保温

ranran1220

随便取的用户名 发表于 2023-11-27 15:35
直接干热灭菌的话是180℃2h 吗 我们还没试过

灭菌去查GB/T 27405,附录D.3

ranran1220

随便取的用户名 发表于 2023-11-27 15:33
您刚刚说的那个灭菌桶灭菌后二次污染的问题我想到了 我是灭菌时是把孔对上的 干燥时孔还需对上吗 再哪 ...

干燥的时候你用高温的话就不需要把孔合上，毕竟高温也是杀菌的，干燥结束取出后给孔闭合后冷却，那么热是不太好闭合的，但是也不是实现不了

楊先生的yang

随便取的用户名 发表于 2023-11-27 15:35
直接干热灭菌的话是180℃2h 吗 我们还没试过

我这干热灭菌是165° 2h 就够了，早上一上班就直接干热灭菌，然后就配试剂高压灭菌，配完试剂就出结果，培养皿可以下午洗，做完实验下午一块洗，大肠的结晶紫煮沸了就行，煮沸完塞橡胶塞，放50°的恒温水浴锅里面放着（天气冷，易凝固）

楊先生的yang

ranran1220 发表于 2023-11-27 16:04
煮好后，我们是用保鲜膜封上的，防止染菌，也防止表层产生干膜，然后放水浴锅保温

别用保鲜膜，用普通的灭菌完的橡胶塞也行，大肠用的是结晶紫中性红胆盐琼脂是吧，煮沸完塞塞子就OK，染菌也不怕，杂菌不会影响结晶紫培养大肠菌群，疑似的大肠就用煌绿乳糖胆盐肉汤去做阳性验证

qq308941794

随便取的用户名 发表于 2023-11-27 14:42
我观察了化验员每天早上来是先登记结果 然后洗培养皿这些 我看他这些做完上午时间都过去好多了 再灭菌烘 ...

提前一天灭菌烘干完全没有问题，只要保证无菌就可以，甚至灭菌后，干燥后用一段时间也可以

qq308941794

1、Q1只要每批次的空白对照都是无菌的，这个操作没有问题，假设都是早上才灭培养皿，那么下午估计还要等160℃降温才能开始做实验；
2、煮沸糊掉主要是培养基加水后没有搅拌溶解、加热使用电热炉火太大，没有变搅拌。可以使用电磁炉；
3、超净工作台是为了提供无菌环境的，能达到100级洁净度，微生物不是直接悬浮于空气中的，需要载体，打开超净工作台才能提供洁净环境，无菌室即使做了净化空调，洁净度大多只有10000级，超净台都配备了，为什么不用呢？

yazhouhou

随便取的用户名 发表于 2023-11-27 15:35
直接干热灭菌的话是180℃2h 吗 我们还没试过

GB/T 27405-2008 《实验室雷竞技百科 控制规范 食品微生物检测》
http://down.www.sqrdapp.com/wap/index.php?moduleid=23&itemid=15512

chenguang123

学习一下，大家都很有经验

一念红尘

我这边一般都是上班先配试剂，然后灭菌，灭完菌直接放水浴锅里。无菌室打开紫外灯，一个小时或者四十五分钟关掉。

接着读数，计数，灭菌，清洗平皿，做表格。

下午就做实验，VRBA需要下午配，现配现做的。配完塞一个橡胶塞子即可（没有灭菌的）配试剂的时候先搅拌均匀再去加热，加热的时候要不停搅拌，等到底部出现大气泡了，就煮好了，防止溢出。

超净洁净台做实验时候酒精灯开着就不开其他的。

希望照耀辉煌

1、如果上午做灭菌时间上不够用，只能下午在做采样然后拿回做实验，一般都是干热灭菌温度超过170℃,3h也就够用了,至于180℃2h也不是不可以。
2、培养基煮沸前要一直用玻璃棒搅动，全过程都要看着，温度不要一直过高，沸腾溢出就是一瞬间的事，快沸腾时候应该拿下来或者余温加热
3、超净台的风机理论上是应该打开的，但是风速会影响到灯的火苗。，不利于操作。