巴西松子中蛋白酶的分离纯化及酶学性质

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巴西松子中蛋白酶的分离纯化及酶学性质

肖 丽，应铁进 ，蔡路昀，韩晓旭

(浙江大学 生物 系统 工程 与食 品科 学学院，浙江 杭 州 310029)

摘 要 ：在 单因素试验基础上 ，通 过正交试验研究pH值 、提 取时间和料液 比3个因素对 巴西松子 中蛋 白酶活力 的影
响 ，得 出巴西松 子中蛋 白酶的最佳提取缓冲液为pH9．0的硼酸一硼砂缓冲液 、提取 时间为60min、料液 比为 1：8(m／ ；
采用(NH4)，so 沉淀 、DEAE-Sepharose FF阴离子 交换 层析分离纯化 巴西松子 中的一种蛋 白酶 ，结果表 明：纯化后蛋
白酶 比活力提高到 了8．61倍 ，回收率为21．65％。十二烷基硫 酸钠一聚丙烯酰胺凝胶 电泳(SDS—PAGE)分析表 明：该蛋

白酶分 子质 量为33kD。酶学 性质 结果表 明：该 蛋 白酶最 适pH值为9．0，属碱 性蛋 白酶 ；反应 的最适温度为50~C；金
属离子Mn 对该 蛋白酶活 性有 强烈的激 活作用，而Ca 、Mg2+和Cu 对 酶活性 有抑 制作用 。

关键词 ：巴西松 子；蛋 白酶；分离纯化 ；酶学性质

猴子258

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