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[LV.10]以坛为家III
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草鱼胰蛋白酶的分离纯化及性质研究 陈珊珊 , 林雄水 , 翁 凌 , 曹敏杰 (集美大学生物工程学院 , 福建 厦门 361021) [摘要 ] 从草鱼肝胰脏中分离纯化出一种胰蛋白酶. 纯化过程包括 : 硫酸铵分级沉淀 , DEAE2Sepharose 离子交换 , Sephacryl S2200凝胶过滤和 Q2Sepharose离子交换层析. SDS2PAGE显示在分子量约为 28. 5 ku处 有单一电泳带 , 表明该酶已得到高度纯化. 以 Boc2Leu2A rg2A rg2MCA为底物测得该酶的最适温度为 40 ℃, 最适 pH值为 9. 0. 丝氨酸蛋白酶抑制剂 ( Pefabloc SC, PMSF, Benzam idine)对该酶的活力有明显抑制作用. 底物特异性实验表明该酶特异性分解精氨酸和赖氨酸残基的 C末端 , 进一步证明纯化蛋白为草鱼胰蛋白 酶 , 其酶学性质与鲤鱼胰蛋白酶相似. |
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