求助该如何正确的配制培养基（PCA、孟加拉红、VRBA）

纪梵安

我是微生物检测的小新，希望各位前辈能多多指导指导是这样的，我看过各培养基的配制说明，PCA和孟加拉红培养基的配制是需要先加热溶解再灭菌15min即可，而VRBA培养基是直接加热煮沸2min就可以了。但由于时间及器材的限制，能够加热的器材只有一个电热炉，而且需要用的量比较多，一种一种的去加热溶解很麻烦，加热溶解后还需要放凉一会才能盖塞拿去灭菌，灭菌需要看着（用的是非自动型的手提式高压灭菌锅），花费的时间比较长。目前配制PCA、VRBA、孟加拉红培养基的方法是：称量对应量的培养基粉末于锥形瓶（未灭菌）中，加水盖塞摇匀后，直接高压蒸汽灭菌25min。因为用的是环凯的培养基，所以制出的培养基比较清澈。


问：1.按我现在配制培养基的方法，会不会影响培养基的性能呢？
2.关于VRBA培养基的配制，如果先将水和锥形瓶拿去灭菌了，再加入培养基粉末去加热煮沸，那煮制的环境需要是无菌的吗？煮制完以后要放在无菌的环境中降温吗？有没有大肠菌群比较多的样品可以检测一下VRBA培养基的有效性？

dlshuij

应该有标准的规定或说明书的规定吧。

dlshuij

非标准的操作有风险。

xilinxu

1.按我现在配制培养基的方法，会不会影响培养基的性能呢？

答： 会的，高温灭菌时间有点长啊

2 答：煮制的环境不需要是无菌，降温的时候要防止污染。拿点动物便便，估计可以检测一下VRBA培养基的有效性

yazhouhou

1，电炉少，就逐个加热溶解，不用放凉，加塞儿包扎，入高压锅灭菌。灭菌条件按照标准说明书规定，不能超时，避免成分被破坏影响培养效果。

2，VRBA培养基的配制，水和锥形瓶无需预先灭菌，是正常清洗的锥形瓶、符合4789.28-2013的配制培养基用水，就行了。煮制的环境，通常的实验室就行，楼主煮PCA的实验室就行。煮制完以后，与其他在检测前融化的琼脂培养基一样的处置。培养基的雷竞技百科 控制，按照参照GB 4789.28-2013 《食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的雷竞技百科 要求》。

bjxcmsa

我想问电炉很贵吗？

yonghengyh

①建议按照配制说明的灭菌时间进行高压灭菌，时间长短会对培养基的性能造成影响。可以通过标准菌株使用不同灭菌时间的培养基培养进行对比验证。
②VRBA使用的锥形瓶要提前高压灭菌；水不非得用无菌水，符合GB 4789.28中的要求即可，定期做好水质检测。煮制/降温环境不需要无菌，但要注意临用现配，拿到无菌室前对锥形瓶外部喷酒精/紫外消毒，在无菌环境中使用培养基。
验证的话最好是使用标准菌株，可从CICC中国工业微生物菌种保藏管理中心处购买。