大肠菌群MPN计数法双料发酵小导管被埋，如何读数

beiren000

求助大神。
大肠菌群MPN计数法双料发酵小导管被埋，如何读数

问过我一个做第三方的朋友，
她的答复是：轻轻摇晃试管查看是否有大量气泡上冒

实际发生的情况:
培养后摇晃无气泡上冒。
为了验证小导管是否有气泡，我用移液管移掉了上面的液体（操作过程试管内没有进气泡），直到露出小导管，这时候尴尬的事情发生了，小导管居然有一点点小气泡。
做下一步吧，这根试管被污染了，不做下一步验证吧，心里忐忑难安。
敢问各位老师：如何解决这个读数问题？

beiren000

备注：
按标准，只能选这个稀释梯度。否则出不了客户要的结果＜30MPN/100g

qiuyang

＜30MPN/100g 这是03版大肠吧？ 这种情况我们也遇到过，一种方法是用待过滤功能的均质袋，测清液是否合格。 另一种方法直接吸取底物检测，小导管看不清楚，我们观察时也是晃动试管看是否持续有汽包望上走，同时嗅气味，产气的一般有股恶臭味

suibian2

乳糖胆盐发酵法其实还有一个特征国标里没有写，就大肠菌群大概率会使得发酵罐从紫色变成黄色，产气并不是唯一的参考指标。当然有些物料本身自带颜色或者是酸性的就另外考虑。
另外初发酵产气只是进入复发酵的一个筛选，你觉得不放心直接进入复发酵确认也可以。
然后真有大肠菌群，通常也不会一点点气泡的了，一般都是很大量的，晃一晃一大堆的。
小倒管个人其实也不怎么看，要不是给国标（×）日常检查（√）几个面子我觉得不放都无所谓，不影响判断，洗倒管还费事

beiren000

suibian2 发表于 2021-4-23 13:53
乳糖胆盐发酵法其实还有一个特征国标里没有写，就大肠菌群大概率会使得发酵罐从紫色变成黄色，产气并不是唯 ...

额……
问题是我不用移液管移除多余的液体，也看不到小导管有气泡呀。
我用了移液管的话，这根试管不就被我污染了吗？再做验证，第一：移出的液体被污染了，第二：试管内的液体不多，也被污染了。
我们执行的标准是：GBT 18869-2019 饲料中大肠菌群的测定 乳糖胆盐发酵法

beiren000

qiuyang 发表于 2021-4-23 13:50
＜30MPN/100g 这是03版大肠吧？ 这种情况我们也遇到过，一种方法是用待过滤功能的均质袋，测清液是否合格。 ...

我们执行的标准是：GBT 18869-2019 饲料中大肠菌群的测定 乳糖胆盐发酵法

你说的这第一种方法有权威出处吗？国标，法规等等？

suibian2

beiren000 发表于 2021-4-23 15:06
额……
问题是我不用移液管移除多余的液体，也看不到小导管有气泡呀。
我用了移液管的话，这根试管不就 ...

你是不是……完全没看清我在说啥……
我没让你管小导管阿

beiren000

suibian2 发表于 2021-4-23 15:39
你是不是……完全没看清我在说啥……
我没让你管小导管阿

嗯。明白了。
划重点：真有大肠菌群，通常也不会一点点气泡的了，一般都是很大量的，晃一晃一大堆的。
我担心的就是一点点气泡的。就如同我那张紫色的照片。

Luchuang0223

样品稀释后需要过滤！从本质上解决问题！

beiren000

Luchuang0223 发表于 2021-4-24 12:11
样品稀释后需要过滤！从本质上解决问题！

请问下，有国标或者法律法规有明文指出 样品稀释后的可以过滤吗？
没有法规，不敢随便操作，怕人家不信服。

wenyang76

把试管倾斜敲一敲，让倒玻管贴着试管壁就方便观察了

beiren000

wenyang76 发表于 2021-4-25 09:46
把试管倾斜敲一敲，让倒玻管贴着试管壁就方便观察了

这个可以有。
感谢提供方法。