5×10^5cfu/ml的金黄色葡萄球菌悬液怎么配置 [

吖轻

各位前辈 老师，公司生产口罩，细菌过滤效率检测需要制备5×10^5cfu/ml的金黄色葡萄球菌悬液，请问这个具该怎么配置？急！！！

foodmate

很久以前好像用比浊管。

yazhouhou

取菌种第3代～14代(或标准规定的代数)的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物（18h～24h），用5.0ml吸管吸取3.0 ml～5.0ml稀释液加入斜面试管内，反复吹吸，洗下菌苔。随后，用5.0ml吸管将洗液移至另一无菌试管中，用电动混合器混合（振荡）20s，或在手掌上振敲80次，以使细菌悬浮均匀。
初步制成的菌悬液，先用细菌浓度比浊测定法粗测其含菌浓度，然后以稀释液稀释至所需使用的浓度。

必须以活菌培养计数的实测结果为准，不得使用根据比浊法判定的估计值。

吖轻

yazhouhou 发表于 2020-8-30 17:33
取菌种第3代～14代(或标准规定的代数)的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物（18h～24h），用5.0ml吸管吸取3.0 ml ...

你好，细菌浓度比浊测定法粗测其含菌浓度，具体的操作步骤是怎样，这个方法没接触过。
活菌培养计数，是取1mL稀释液倾注培养后计算菌落数吗？

吖轻

foodmate 发表于 2020-8-30 12:39
很久以前好像用比浊管。

具体是如何操作的

yazhouhou

吖轻 发表于 2020-9-1 19:58
你好，细菌浓度比浊测定法粗测其含菌浓度，具体的操作步骤是怎样，这个方法没接触过。
活菌培养计数，是 ...

1、比浊粗测 : 配制不同浓度的麦氏标准比浊管，调制菌悬液。用比浊仪测定、或者肉眼观察，将二者比较，得到菌悬液的麦氏浊度。通常认为，0.5麦氏比浊单位时，相当于1.5×10^8 CFU/mL 的细菌浓度。据此推算、调整菌液浓度，再逐级稀释至预期浓度。麦氏比浊管的硫酸和氯化钡配方比例、各麦氏浊度对应的细菌浓度，查相关书籍，好像咱们雷竞技官网怎么样 也有帖子涉及。

2、活菌培养计数 : 对菌悬液稀释，选择适宜稀释度（以预计生长菌落数每平板为 15CFU～300 CFU者为宜)，1mL入平皿，作平行，倾注营养琼脂，36°C培养48h，计数菌落、结合稀释度进行计算。

吖轻

yazhouhou 发表于 2020-9-1 20:59
1、比浊粗测 : 配制不同浓度的麦氏标准比浊管，调制菌悬液。用比浊仪测定、或者肉眼观察，将二者比较，得 ...

是否可以直接进行活菌培养计数法？

yazhouhou

吖轻 发表于 2020-9-2 20:02
是否可以直接进行活菌培养计数法？

当然可以了。反正，也以活菌培养计数为准。
当然，首先以检测标准的规定为准啊。

李漂亮

你好，能配置出来吗？

吖轻

李漂亮 发表于 2020-9-10 15:56
你好，能配置出来吗？

还没配置出来

XCH6785753

yazhouhou 发表于 2020-9-1 20:59
1、比浊粗测 : 配制不同浓度的麦氏标准比浊管，调制菌悬液。用比浊仪测定、或者肉眼观察，将二者比较，得 ...

要是目前没有比浊管、比浊仪，还有别的办法么？

yazhouhou

XCH6785753 发表于 2020-10-10 23:50
要是目前没有比浊管、比浊仪，还有别的办法么？

可以用化学试剂自己配个比浊管，目视比浊。
比浊法，只是预估。还是要以活菌培养计数的实测结果为准。

除了用斜面培养物制作菌悬液，还可以，把细菌接种到肉汤里过夜培养，认为此液细菌浓度大约为 10^9 CFU/mL 数量级，再逐级稀释到预期浓度吧，确切浓度数值要以试验同时所作的活菌培养计数的实测结果为准 。