GB 4789.10-2016食品中金黄色葡萄球菌（定量）检验检测的能力验证

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品中金黄色葡萄球菌（定量）检测的能力验证

（GB 4789.10-2016）

一、做能力验证态度很重要，重视，重视，重视。

二、前期做好充足的准备工作，根据国家标准，尽可能制定一个检验检测的方案，以便保证结果的准确性。（虽然国标已经说得很清楚了，但是好记性不如烂笔头，还是写个能力验证的检测方案吧！毕竟能力验证和检样还是可以有点不同的，尽可能充分利用待检样品）

三、样品来源：2瓶不同的真空西林瓶装白色冻干粉末样品

四、样品处理

样品储存：-15℃以下冷冻保存

样品活化步骤（建议）：-20℃ — 4 ℃（30min） — 室温（30min）— 样品再水化；尽量减少大范围温度变化对待测样品的影响。

样品再水化：一般能力验证样品以国体粉末形式发放，以液体（CFU/mL）形式出报告。样品再水化前一定要认真、仔细阅读作业指导书，无特殊规定，水化后的样品为40mL待测原液。

五、B-P平板计数（20 CFU ~200 CFU）

（1）1号样品：37℃，培养48h

100稀释（接种量0.3mL,0.3mL,0.4mL）

1000倍稀释（接种量0.3mL,0.3mL,0.4mL）

（2）2号样品：37℃，培养48h

10稀释（接种量0.3mL,0.3mL,0.4mL）

100稀释（接种量0.3mL,0.3mL,0.4mL）

平板涂布不是很好，有少部分菌落跑到了平板边缘处，对于计数会有些影响。大家在该操作过程中涂布棒尽量不要接触平板边缘。

注意事项：

a.B-P琼脂平板制作：尽量在试验前一天制作好，当天制作平板得出的结果与之相差较大，原因可能是平板涂布时没有完全干燥导致的。

b.梯度稀释（25mL+225mL）：是关键步骤，必须尽可能地减少误差（新手建议涡旋混匀，涡旋时间不宜过长，长时间离心力等作用下，微生物细胞可能死亡）。

c.涂布：尽可能涂布均匀，不要接触平板边缘，避免菌落叠在一起，而导致无法计数。

六、血平板（溶血观察）

挑取平板5个菌落进行试验（只列出前三个菌落结果）

（1）1号样品溶血情况（正反面）

（2）2号样品溶血情况（正反面，只列出前三个菌落结果）

七、血浆凝固酶试验

（1）营养琼脂斜面和BHI肉汤

（2）血浆凝固酶试验（冻干兔血浆：青岛海博）

1号样品：

2号样品：

八、镜检

（1）1号样品

（2）2号样品

条件有限，只能用手机拍摄

九、能力验证结果

有些粗糙，不足之处，欢迎讨论交流!

foodslover

规范操作，值得学习。

jemmy138

好习惯，值得学习，真想转给我们实验室同志们看看

devil0456

感谢分享，好帖子，图文并茂

卡士Mr方

感谢大佬的分享

野兽

结果不错，不过，血浆凝固酶实验缺少标准规定的阳性对照和阴性对照，雷竞技百科 管理能力差评。

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野兽 发表于 2019-12-26 21:09
结果不错，不过，血浆凝固酶实验缺少标准规定的阳性对照和阴性对照，雷竞技百科 管理能力差评。

老师您说的很对，需要加强。之前只用标准菌株对该批次的冻干兔血浆进行了验收，考虑个别原因，这次没上标准菌株来做质控，这是个缺陷，谢谢老师的建议。

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卡士Mr方 发表于 2019-12-26 21:05
感谢大佬的分享

谢谢，谢谢！

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devil0456 发表于 2019-12-26 17:27
感谢分享，好帖子，图文并茂

谢谢版主，还有许多不足之处，讨论改进。

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foodslover 发表于 2019-12-26 16:43
规范操作，值得学习。

谢谢，谢谢！

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jemmy138 发表于 2019-12-26 17:19
好习惯，值得学习，真想转给我们实验室同志们看看

谢谢，谢谢！

xiaodainv

一次就过了吗？太厉害了，我们单位有这个计划，但是我没有胆量啊