关于GB5009.259-2016生物素测定的一些疑问

卡登仕

因为第一次做，看了一下标准，有一些不解的地方还请懂的前辈指导
1.标准中的试剂 50%乙醇溶液，0.85%氯化钠溶液，氢氧化钠溶液，盐酸溶液等试剂，是否需要灭菌处理后再使用？标准中没有提到需要灭菌是不是就不用灭菌了
2.接种液的制备中 菌株接种乳酸杆菌肉汤培养后，离心弃去上清液再用0.85%氯化钠溶液离心弃上清液3次，最后稀释至透光率80%
这三次离心弃上清液每次加0.85%氯化钠溶液多少毫升？最后稀释至透光率80%是用紫外分光光度计测上清液还是混匀的菌悬液？标准上面并没有详细说明
关于稀释至透光率80%这一项一般需要加多少氯化钠溶液合适

希望做过这个实验的朋友指导指导，万分感谢

粉刷匠

5009的是不是应该理化的呀

lingping987

1.以上试剂除氯化钠以外其他不需要灭菌
2.清洗液的量可以随便加，测的是菌悬液，加的量要看你的菌浓没有一定的值

lemoon

强烈要求修改方法标准

lionguy

自己做一个方法学验证试验，然后编写出来该项检测的“检验操作规程”。以后就按照规程进行检验即可。好多标准的细节都不一定说的非常精细，所以需要自己做一个方法学验证。另外，有部分疑问纯属多余的！凡是操作与微生物有关的试验，所有的试液、器皿都需要在无菌状态下进行，否则，检测结果不可靠，这可是基本常识，无需置疑是否灭菌