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广谱抗生素和肾上腺皮质激素的广泛应用乃至滥用,改变了机体对感染的防御机能,使某些条件致病菌有机会致病。酵母样菌所致的真菌感染较为常见,并有逐年增加的趋势。为了提高其诊断率和治愈率,临床急需一种方便简洁的新技术代替传统的常规鉴定方法。科玛嘉念珠菌显色培养基是法国生产的一种新的分离和鉴定合二为一的培养基。其培养基的基本工作原理是:在分离培养基中加入检测某种菌种的特异性酶底物,该底物为人工合成由产色基团和微生物可代谢物质组成,通常为无色,但在特异性酶作用下,游离出发色基团并显示一定颜色,直接观察菌落颜色即可对菌种做出鉴定[1]。我们采用此培养基与传统的沙保弱培养基对酵母样菌的分离鉴定进行比较,现将结果报告如下:
1资料与方法
1.1 一般资料
收集2005年1月-2006年1月间住院及门诊患者送检痰标本625 例。培养基:沙保弱培养基由杭州天和微生物试剂有限公司提供。显色培养基由河南郑州博赛生物技术研究所分装、销售。均按说明书配制。
1.2 方法
将标本接种于沙保弱培养基上,30℃培养挑取可疑菌落经涂片、革兰染色确定为酵母菌孢子后,同时作碳源同化实验、芽管实验等进行鉴定,将念珠菌鉴定至种。7 d不生长者报告阴性。同时接种至显色培养基上,30℃培养48 h后依据菌落显示的颜色进行菌种鉴定,其中绿色为白色念珠菌,兰色为热带念珠菌,粉红色为克柔念珠菌,紫色为光滑念珠菌,白色为其他酵母菌。
2 结 果
625 例送检标本中,沙保弱培养基与显色培养基上真菌生长阳性率相同34.9%(218/625)。除了酵母样菌外还有2 例烟曲霉菌均在沙保弱培养基和显色培养基上生长。白色念珠菌有2 例在显色培养基上没有显色,占1.2%(2/168),其他念珠菌没有出现显绿色的假阳性培养。有3 例标本是两种念珠菌混合感染,在沙保弱培养基上菌落形态相似,只鉴定出了白色念珠菌;而在显色培养基上均为白色念珠菌和热带念珠菌混合感染,颜色鲜明很容易判断。在显色培养基上为白色的菌落只能用常规法鉴定,占7.3%(16/219)。酵母样菌菌种分布及两种培养基的鉴定符合率见表1。表1 酵母样菌菌种分布及鉴定符合率
3 讨 论
显色培养基根据菌落的颜色,在分离的同时鉴定出白色念珠菌、热带念珠菌、克柔念珠菌、光滑念珠菌,从表1中可以看出白色念珠菌占76.7%、热带念珠菌占10.1%、克柔念珠菌占5.0%、光滑念珠菌占1.8%,4种合计占93.6%,与应春妹等[2]报道一致。并且可以看出显色培养基对上述常见念珠菌可直接从临床标本中分离培养鉴定并可在48 h后作出准确报告。沙保弱培养基上培养后,还需芽管试验、厚壁孢子试验、糖发酵、同化试验等一系列复杂的试验。它需要有一定的专业水平的人员才能操作,在一些基层医疗单位难以开展。显色培养法与沙保弱培养法符合率为94.0%,且显色培养法具有简便、快速、技术要求低的优点,适合临床常规工作中应用。有2 例白色念珠菌在显色培养基上未显绿色而呈白色,原因需进一步探究。另外在工作中发现在沙保弱培养基上有2 例铜绿假单胞菌生长,而在显色培养基上无生长。表明显色培养基杂菌抑制能力强于沙保弱培养基。
综上所述,显色培养基在分离鉴定酵母样菌中显示出操作简便,结果鲜明,抑杂菌强,混合感染一目了然的优点。优于沙保弱培养基。
【参考文献】
[1] 吴清平,周艳红,蔡芷荷.卫生微生物特异性显色培养基的研究与应用[j].中国卫生检验杂志,2005,15(1):125.
[2] 应春妹,杨海慧,张蕙芳.科玛嘉念珠菌显色培养基在酵母菌鉴定中的应用[j].上海医学检验杂志,2001,16(3):15.